¿Isocrático o no isocrático?

Para mejorar el efecto de separación y lograr evidenciar señales más claras, para diferentes corridas de una misma muestra, asumiendo que se cuenta con una sola clase de columna cromatográfica, se pueden realizar gradientes en el solvente de elución.

Existen 2 formas básicas de utilizar el solvente: Isocrático, lo cual significa que el solvente conserva la misma concentración durante todo el tiempo de corrida (muestreo o análisis), sea que se trate de un solvente puro o de mezclas de solventes.

Por otro lado, está el sistema No-Isocrático, lo cual significa que la concentración del solvente utilizado varía durante la corrida. Esto depende del tipo de muestra, de columna y de la necesidad del análisis de mejorar alguna separación (depende del analista o investigador). La idea es que la fuerza de arrastre de la fase móvil aumente gradualmente durante la corrida, de modo que pueda desplazar a los compuestos que se encuentren más fuertemente retenidos en la fase estacionaria.

Existe dos tipos de sistemas para el mezclado de solventes: Alta presión y Baja presión. En el sistema de Alta presión, se poseen bombas individuales para cada solvente y el mezclado se realiza después de haber pasado las bombas, en un mezclador previo al inyector. En el sistema de baja presión se posee una válvula de mezclado previo a una única bomba de presión.